Набор для прямой ОТ-КПЦР
Описание комплекта:
◮ Набор Direct RT-qPCR, использующий обратную транскриптазу Foreasy и ДНК-полимеразу Foreasy HS Taq, разработанные Foregene, с уникальным реакционным буфером, делает этот набор очень устойчивым и совместимым, и он может напрямую тестировать реакцию, используя систему Foregene Lysis в качестве матрицы.Этот набор может применяться для разработки набора для обнаружения нуклеиновой кислоты COVID-19 и набора для обнаружения нуклеиновой кислоты других патогенных бактерий.
Описание
Комплект Direct RT-qPCR содержит отдельно упакованный буфер для RT-qPCR и высокоэффективный фермент.смесь (Taq, M-MLV, RI), что делает ее удобной для создания внутренних комплектов и системрегулировка，в пределах простая проверка.
Технические характеристики
500 т, 50 000 т
Компоненты комплекта
| Комплектация (реакционная система 20 мкл) | ИМ-05111-01 | ИМ-05112-01 |
| 500 т | 50 000 т | |
| Прямая ферментная смесь | 500 мкл×1 | 50 мл×1 |
| 2 × буфер для прямой RT-qPCR | 1 мл×5 | 500 мл×1 |
| Инструкция | 1 | 1 |
Операционные шаги
Перед приготовлением реагентов все реагенты в наборе следует разморозить при комнатной температуре и осторожно перемешать.
A: Подготовить of шаблон и реагент
1. Подготовьте подготовленную РНК-матрицу (рекомендуется использовать набор серии Foregene Total RNA Isolation Kit для извлечения и очистки матрицы РНК) или продукт для крекинга образцов (рекомендуется использовать систему Foregene Lysis), специальные праймеры (10 мкМ) и другие соответствующие расходные материалы, инструмент.
2. Поместите 2 × буфер для прямой RT-qPCR, не содержащий РНКаз ddH2O и 20 × эталонный краситель ROX (если он's) в коробке со льдом, чтобы они таяли естественным образом, и аккуратно перемешивались.
B: Подготовить of ОТ-кПЦР система
Стол 1 : Подготовить of ОТ-кПЦР sсистема
| Компонент | Объем | Конечная концентрация |
| 2 × буфер для прямой RT-qPCR | 10 мкл | 1× |
| Прямая ферментная смесь | 1мкл | |
| Передовой праймер (10 мкМ) | 0,8 мкл | 50-900 нМ |
| Обратный праймер (10 мкМ) | 0,8 мкл | 50-900 нМ |
| Зонд (4 мкМ) | 1мкл | 200 нм |
| Матрица (РНК или лизат) | Х мкл | |
| 20 × Эталонный краситель ROX | - | 1* |
| РНКаза-свободнаяddH2O | (6,4-Х) мкл | |
| Общий объем | 20мкл |
C: Набор в RT-qPCR реакция программа
Стол 2 : ОТ-кПЦР реакцияon программа параметр (для пример: два-шаг метод)
| Шаг | Температура | Время | Циклы | Содержание | |
| 1 | 50℃ | 15 мин | 1* | 1 | Обратная транскрипция |
| 2 | 95℃ | 1 мин | 1 | Предварительная денатурация | |
| 3 | 95℃ | 10 сек | 40-45 | Денатурация | |
| 60 ℃ | 30 сек 2* | Отжиг/Расширение | |||
Хранение и срок годности
-Комплект следует хранить при -20± 5℃.Срок действия 12 месяцев.
- Избегайте повторяющихся циклов замораживания-оттаивания (<5 циклов).
