Комплект ForeDirect RT-qPCR
Описание комплекта:
◮Для прямой амплификации РНК в режиме реального времени из коллекций мазков без процессов очистки РНК.Этот набор завершает циклы qRT-PCR в течение одного часа.Смесь ферментов представляет собой оптимизированную смесь обратной транскриптазы, ДНК-полимеразы Hot-Start Taq и ингибитора РНКазы.Реакционный буфер содержит все необходимые компоненты, в том числе оптимизированные компоненты буфера, Mg2+, dUTP и dNTP.
Описание
Набор ForeDirect RT-qPCR Kit предназначен для прямой амплификации РНК в режиме реального времени из коллекций мазков без процессов очистки РНК.Этот набор завершает циклы qRT-PCR в течение одного часа.Смесь ферментов представляет собой оптимизированную смесь обратной транскриптазы, ДНК-полимеразы Hot-Start Taq и ингибитора РНКазы.Реакционный буфер содержит все необходимые компоненты, в том числе оптимизированные компоненты буфера, Mg2+, dUTP и dNTP.
Технические характеристики
100т
Компоненты комплекта
| Агент высвобождения нуклеиновой кислоты |
| РНК-протектор |
| 2 × буфер RT-qPCR |
| Ферментная смесь (Taq&M-MLV) |
| инструкции |
Применение ПЦР
1. После непродолжительного центрифугирования реакционных пробирок для ПЦР поместите их в емкость для проб прибора для амплификации.
2. Тепловой протокол
| Шаг | Температура | Время | Циклы | |
| 1 | Обратная транскрипция | 50℃ | 15 минут | 1 |
| 2 | Предварительная денатурация | 95℃ | 1 мин | 1 |
| 3 | Денатурация | 95℃ | 10 секунд | 42 |
| 4 | Отжиг/Расширение | 60 ℃ | 30 секунд | |
Примечание:Флуоресцентный сигнал регистрировали сразу после этапа удлинения каждого цикла.
3. После настройки сохраните файл и запустите программу реакции.
Операционные шаги
Перед приготовлением реагентов все реагенты в наборе следует разморозить при комнатной температуре и осторожно перемешать.
Подготовка реагентов
1. Подготовьте смесь для высвобождения нуклеиновой кислоты.
| Компонент | Объем на образец или контроль |
| Агент высвобождения нуклеиновой кислоты | 5 мкл |
| РНК-протектор | 0,5 мкл |
2. Подготовьте реакционную смесь
| Компонент | Объем на образец или контроль |
| 2 × буфер RT-qPCR | 15 мкл |
| Ферментная смесь (Taq&M-MLV) | 1,5 мкл |
| Праймеры и зонды | 1 мкл |
Хранение и срок годности
-Комплект следует хранить при -20± 5℃.Срок действия 12 месяцев.
- Избегайте повторяющихся циклов замораживания-оттаивания (<5 циклов).
