page_banner

Набор Cell Direct RT qPCR — SYBR GREEN I

Описание комплекта:

◮Простой и эффективный: с технологией Cell Direct RT образцы РНК можно получить всего за 7 минут.

Потребность в образцах невелика, можно протестировать всего 10 ячеек.

◮Высокая пропускная способность: позволяет быстро обнаруживать РНК в клетках, культивируемых в 384, 96, 24, 12, 6-луночных планшетах.

DNA Eraser может быстро удалить высвободившиеся геномы, что значительно уменьшит влияние на результаты последующих экспериментов.

Оптимизированная система RT и qPCR делает двухэтапную обратную транскрипцию RT-PCR более эффективной, а PCR более специфичной и более устойчивой к ингибиторам реакции RT-qPCR.

форегенная сила


Информация о продукте

Теги продукта

Часто задаваемые вопросы

Описания

В этом наборе используется уникальная буферная система для лизиса, которая может быстро высвобождать РНК из культивируемых образцов клеток для реакций RT-qPCR, тем самым устраняя трудоемкий и трудоемкий процесс очистки РНК.Матрицу РНК можно получить всего за 7 минут.5×Прямой микс RT и 2×Реагенты Direct qPCR Mix-SYBR, входящие в комплект, позволяют быстро и эффективно получать количественные результаты ПЦР в реальном времени.

5×Прямой микс RT и 2×Прямая qPCR Mix-SYBR обладает высокой устойчивостью к ингибиторам, и лизат образцов можно использовать в качестве матрицы для RT-qPCR напрямую.Этот набор содержит уникальную высокоаффинную обратную транскриптазу Foregene для РНК и ДНК-полимеразу Hot D-Taq, dNTPs, MgCl.2, реакционный буфер, оптимизатор ПЦР и стабилизатор.

Характеристики

200×20μл Rxns, 1000×20μл Rxns

Компоненты комплекта

Часть I

Буфер CL

Фореген Протеаза Плюс II

Буфер СТ

Часть II

Ластик ДНК

5 × Прямая RT Микс

2 × Прямая кПЦР Mix-SYBR

50× Эталонный краситель ROX

ddH2O без РНКазы

инструкции

Особенности и преимущества

Просто и эффективно: с технологией Cell Direct RT образцы РНК можно получить всего за 7 минут.

■ Потребность в образцах невелика, можно протестировать всего 10 ячеек.

■ Высокая производительность: он может быстро обнаруживать РНК в клетках, культивируемых в 384-, 96-, 24-, 12- и 6-луночных планшетах.

■ DNA Eraser может быстро удалить высвободившиеся геномы, что значительно снизит влияние на результаты последующих экспериментов.

■ Оптимизированная система RT и qPCR делает двухэтапную обратную транскрипцию RT-PCR более эффективной, а PCR более специфичной и более устойчивой к ингибиторам реакции RT-qPCR.

Применение комплекта

Область применения: культивируемые клетки.

- РНК, высвобождаемая при лизисе образца: применимо только к шаблону RT-qPCR этого набора.

- Набор можно использовать для следующих целей: анализ экспрессии генов, проверка эффекта сайленсинга генов, опосредованного siRNA, скрининг лекарств и т. д.

Диаграмма

Диаграмма Cell Direct RT qPCR

Хранение и срок годности

Часть I этого комплекта следует хранить при температуре 4 ℃;Часть II следует хранить при температуре -20 ℃.

 Foregene Protease Plus II следует хранить при температуре 4℃, не замерзать при -20 ℃.

 Реагент 2×Прямая ПЦР Mix-SYBR должна храниться при -20во тьме;при частом использовании его также можно хранить на 4℃ для кратковременного хранения (израсходовать в течение 10 дней).


  • Предыдущий:
  • Следующий:

  • Принципы разработки праймеров для ПЦР в реальном времени

    Прямой праймер и обратный праймер

    Для ПЦР в реальном времени очень важен дизайн праймера.Праймеры связаны со специфичностью и эффективностью ПЦР-амплификации и могут быть разработаны с учетом следующих принципов:

    Длина праймера: 18-30 п.н.

    Содержание GC: 40-60%.

    Значение Tm: Программное обеспечение для проектирования праймеров, такое как Primer 5, может определить значение Tm праймера.Значения Tm восходящего и нисходящего праймеров должны быть как можно ближе.Также можно использовать формулу расчета Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).При проведении ПЦР в качестве температуры отжига обычно выбирается температура ниже значения Tm праймера, равного 5 °C (соответствующее повышение температуры отжига может повысить специфичность реакции ПЦР).

    Праймеры и продукты ПЦР:

    Длина продукта ПЦР-амплификации праймеров дизайна предпочтительно составляет 100-150 п.н.

    По возможности следует избегать грунтовок для дизайна во вторичной структурной области шаблона.

    Избегайте образования 2 или более комплементарных оснований между 3'-концами вышестоящего и нижестоящего праймеров.

    3'-концевое основание праймера не может содержать 3 дополнительных последовательных G или C.

    Сами праймеры не могут иметь комплементарных структур, иначе будет образовываться шпилечная структура, влияющая на ПЦР-амплификацию.

    ATCG должен быть распределен как можно более равномерно в последовательности праймера, и следует избегать 3'-концевого основания в виде T.

    Приложение 1:Дополнительный пакет компонентов Cell Direct RT-qPCR Kit

    1.Раствор для лизиса клеток


    Раствор для лизиса клеток

    Компоненты комплекта

    (24-луночная система лизиса/лунка)

    ДРТ-01011-А1

    ДРТ-01011-А2

    100 т

    500 т

    Частья

    Буфер CL

    20 мл

    100 мл

    Фореген Протеаза Плюс II

    400 мкл

    1 мл × 2

    Буфер СТ

    1 мл × 2

    10 мл

    ЧастьII

    Ластик ДНК

    400 мкл

    1 мл × 2

    2. RT Микс


    РТ Микс

    Компоненты комплекта

    (20 мкл реакционной системы)

    ДРТ-01011-В1

    200 т

    5 × Прямая RT Микс

    800 мкл

    ddH без РНКазы2O

    1,7 мл × 2

     

    3. Смесь для ПЦР


    смесь для КПЦР

    Компоненты комплекта

    (20 мкл реакционной системы)

    ДРТ-01011-C1

    ДРТ-01011-C2

    200 т

    1000 т

    2 × Прямая кПЦР Mix-SYBR

    1 мл × 2

    1,7 мл × 6

    50× Эталонный краситель ROX

    40 мкл

    200 мкл

    ddH без РНКазы2O

    1,7 мл

    10 мл

    Напишите свое сообщение здесь и отправьте его нам