Lnc-RT Heroᵀᴹ I (с гДНазой) (суперпремикс для синтеза кДНК первой цепи из днРНК)
Технические характеристики
25×20μл рхнс, 50×20μл Rxns
Lnc-RT HeroTM I (с гДНазой) представляет собой систему обратной транскрипции, специально разработанную для днРНК для быстрого удаления загрязнения геномной ДНК.5×gDNase Mix может быстро удалить оставшийся геном в РНК при 42°C в течение 2 минут, эффективно избегая влияния генома на результаты количественной ПЦР.
5×L-RT HeroTM Mix содержит обратную транскриптазу Foregene LncRNA, специально разработанную Foregene, которая представляет собой новый тип обратной транскриптазы специально для матриц lncRNA и других длинных сложных РНК, с более сильным сродством к РНК и более высокой эффективностью обратной записи.Оптимизированная система увеличивает скорость обратной транскрипции и может легко транскрибировать матрицы РНК с высоким содержанием GC и сложной вторичной структурой.Синтез первой цепи кДНК может быть завершен при 42°С за 15 минут.
Компоненты комплекта
| 5× гДНазная смесь |
| 5× L-RT HeroTM Микс |
| ddH2O без РНКазы |
| инструкции |
Особенности и преимущества
■Эффективная способность удалять гДНК, которая может удалить гДНК в матрице в течение 2 минут.
■ Он может эффективно реверсировать транскрипцию днРНК.Когда продукт обратной транскрипции подвергают количественной ПЦР, значение Ct ниже, чем у обычной системы обратной транскрипции.
■ Эффективная система обратной транскрипции, для завершения синтеза первой цепи кДНК требуется всего 15 минут.
■ Сложные шаблоны: шаблоны с высоким содержанием GC и сложной вторичной структурой также можно реверсировать с высокой эффективностью.
■ Высокочувствительная система обратной транскрипции, шаблоны уровня pg также позволяют получать высококачественную кДНК.
■ Система обратной транскрипции обладает высокой термостабильностью, оптимальная температура реакции 42℃, и он по-прежнему имеет хорошие показатели обратной транскрипции при 50℃.
Применение комплекта
Относительный количественный анализ днРНК.
Абсолютный количественный анализ днРНК.
Он может быстро и точно анализировать следы РНК, такие как РНК-вирусы.
Обратная транскрипция РНК-матриц с высоким содержанием GC или сложной вторичной структурой.
Рабочий процесс
Хранение и срок годности
Комплект следует хранить при -20°C. Хранить продукт в холодильнике с постоянной температурой при -20°C сразу после получения.Если условия хранения являются подходящими, производительность продукта не ухудшится в течение 1-летнего срока годности.
Руководство по анализу проблем
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-специфическое усиление
1. Неразумный дизайн праймера
Рекомендация: Разработайте праймеры в соответствии с принципами дизайна праймеров.
2. Остатки генома.
Предложение: Убедитесь, что температура реакции удаления геномной ДНК на первом этапе составляет 42 ° C, а время реакции также может быть увеличено до 5 минут.
Нет сигнала амплификации с помощью RT-qPCR
1. РНК деградирует.
Рекомендация: Материал для выделения РНК должен быть максимально свежим, а также должна использоваться качественная и высокоочищенная РНК.
2. РНК содержит ингибиторы.
Рекомендация: Ингибиторы обратной транскрипции обычно включают SDS, соли гуанидина, ЭДТА и т. д. Для удаления ингибиторов рекомендуется промыть осадок РНК 70% этанолом.
3. Вопросы дизайна праймера.
Рекомендация: В соответствии с принципом конструкции капсюля перепроектируйте капсюли для проверки.
Целевая полоса появляется в пустом элементе управления
1. Загрязнение рабочих инструментов или реагентов.
Рекомендация: Все реагенты или оборудование для эксперимента следует автоклавировать.Будьте осторожны и осторожны при обращении, чтобы образцы ДНК не попали в пипетку или не высыпались из центрифужной пробирки.
2. Загрязнение произошло во время подготовки реакционной системы ПЦР.
Рекомендация: При обращении с продуктом соблюдайте необходимые меры предосторожности, такие как: ношение латексных перчаток, использование наконечников с фильтром.Используйте смесь для ПЦР в реальном времени в защищенной от контаминации системе.
3. Праймеры разлагаются.
Предложение: Используйте электрофорез SDS-PAGE, чтобы определить, деградировали ли праймеры, и замените их новыми праймерами для экспериментов по обнаружению флуоресценции.
Инструкция по эксплуатации:
