Введение:

Молекулы РНК могут интенсивно взаимодействовать с другими биологическими молекулами, такими как белок, ДНК и РНК, и, таким образом, существуют в клетках и организмах в виде макромолекулярных комплексов.Среди них РНК-белковые комплексы существование и функция РНК Одна из важных форм.Анализ РНК — это классический метод скрининга и идентификации молекул РНК, особенно взаимодействующих белков молекул днРНК, который признан большинством исследователей и авторитетными международными академическими журналами.Сегодня FORREGENE поделится с вами экспериментальным принципом и техническим процессом извлечения РНК, возможно, вы сможете его использовать.

1. Экспериментальный принцип технологии вытягивания РНК:

In vitro транскрипция и синтез меченных биотином целевых днРНК или фрагментов днРНК (включая фрагменты РНК, используемые в качестве положительных и отрицательных контролей) и инкубация с клеточными экстрактами;используйте магнитные шарики с авидином для сбора комплексов РНК-белок или РНК-РНК. После тщательной промывки комплекс элюируют.При обнаружении молекулы белка-мишени, которая взаимодействует с днРНК, проводят электрофорез белка на продукте вытягивания РНК, определяют белок-мишень с помощью окрашивания серебром и разрезают гель для масс-спектрометрии;также непосредственно выполнять вестерн-блоттинг продукта извлечения;при обнаружении Для молекул-мишеней РНК, которые взаимодействуют с днРНК, продукты вытягивания РНК подвергают выделению РНК и проводят специфическое обнаружение qRT-PCR.

2. Процесс эксперимента по технологии вытягивания РНК:

3. Техническая служба по удалению РНК FOREGENE:

Культура клеток

Приготовление экстракта клеточного общего/ядерного/плазменного белка

Эксперимент по вытягиванию РНК

электрофорез SDS-PAGE, окраска серебром

Масс-спектрометрия и эксперименты с ВБ

Экспериментальный отчет

4. Экспериментальный случай

На следующем рисунке показаны результаты анализа РНК FJ Bio-Bio и обнаружения электрофореза в SDS-PAGE, где красной стрелкой отмечена полоса различия:

Исследовательская группа профессора Сун Сюй из Сычуаньского университета накопила 15-летний многолетний опыт в области исследований днРНК.Foregene Bio и исследовательская группа профессора Сун Сюй совместно запустили технологию извлечения РНК из днРНК, которая даст вам удовлетворительный результат для вашего эксперимента.