Широко используется фермент Taq с горячим стартом.По сравнению с обычной ДНК-полимеразой, фермент Taq с горячим стартом может эффективно избежать некоторой неспецифической амплификации и образования димеров праймеров, а также может эффективно повысить вероятность успеха амплификации целевого гена.Особенно в области генетического тестирования фермент Taq с горячим стартом был определен в качестве обязательного стандарта в отрасли, и обычная ДНК-полимераза не должна использоваться.Как видно из вышеизложенного, широко используются ферменты Taq горячего старта.В настоящее время на отечественном рынке представлено много марок ферментов Taq с горячим стартом, но ферментов Taq с горячим стартом высокого качества не так много.Столкнувшись с таким количеством ферментных продуктов Taq с горячим стартом, что нам следует выбрать?

1. Выберите фермент Taq с горячим стартом с высокой эффективностью амплификации.

Эффективность амплификации ПЦР тесно связана с эффективностью фермента Taq.После оптимизации хорошей реакционной системы фермента Taq эффективность амплификации превышает 95%, а диапазон амплификации исходного количества матрицы широк.Удовлетворительная амплификация может быть получена, когда содержание целевого гена низкое, и его нелегко отравить, когда количество матрицы велико, а период экспоненциальной амплификации длительный.Для фермента Taq с низкой производительностью, даже если реакционная система оптимизировалась много раз, эффективность амплификации по-прежнему составляет менее 90%, S-образная форма кривой амплификации не очевидна, наклон небольшой, а кривая плоская.Когда количество шаблона мало, его нельзя усилить, а когда количество шаблона велико, эффект усиления не идеален.Поэтому выбор ДНК-полимераз с высокой эффективностью амплификации имеет решающее значение для успеха ПЦР и количественной ПЦР.

2. Выберите фермент Taq с горячим стартом с высокой ферментативной силой.

Ферментативная сила фермента Taq связана с эффективностью амплификации.Как правило, чем сильнее ферментативная сила фермента Taq с горячим стартом, тем длиннее период экспоненциального роста амплификации ПЦР, более типична «S-образная» кривая, выше значение сигнала флуоресценции и тем больше она подходит для обнаружения мультиплексной ПЦР.Фирменные ДНК-полимеразы со слабой ферментативной активностью обычно могут поддерживать только 2-плексные реакции.При выполнении 3-плексных реакций кривая амплификации низкая, значение сигнала флуоресценции низкое, и нет типичной кривой амплификации, поэтому результаты трудно оценить.

3. Выберите фермент Taq с горячим стартом и высокой чувствительностью.

Вообще говоря, ДНК-полимераза обладает высокой эффективностью амплификации и высокой чувствительностью, но есть и несоответствия.Если количество целевого гена в амплифицируемом образце низкое, рекомендуется проверить чувствительность амплификации фермента Taq.Наиболее распространенный метод обнаружения заключается в проведении 10-кратного или 5-кратного градиентного разведения фрагмента плазмиды целевого гена, проведении ПЦР-детекции при более низком разведении и выборе фермента Taq с горячим стартом с более высокой чувствительностью обнаружения.

Из вышеизложенного видно, что исследователям необходимо выбирать в соответствии со своими собственными экспериментальными требованиями и условиями финансирования.Лучше всего провести эксперимент по амплификации с градиентным разбавлением, чтобы определить эффективность амплификации и чувствительность фермента Taq с горячим стартом.

Пример Foregene'ДНК-полимераза Taq:

ДНК-полимераза Foreasy HS Taq

Описание

ДНК-полимераза Foreasy HS Taq представляет собой ДНК-полимеразу, экспрессируемую в инженерных бактериях Escherichia coli с помощью технологии рекомбинации генов.Фермент сочетается с уникальным реакционным буфером, что делает продукт очень устойчивым и совместимым, и позволяет напрямую использовать лизат образца (система лизиса Foregene) в качестве матрицы для реакций обнаружения.

Приложение

Качественная ПЦР и количественная ПЦР для обнаружения очищенных и неочищенных матриц.

Контроль качества

1. Активность экзогенных нуклеаз не обнаружена.

2. Метод ПЦР для обнаружения остаточной геномной ДНК без хозяина

3. Он может эффективно усиливать однокопийные гены в геноме человека.

4. Хранить при комнатной температуре в течение недели, без очевидных изменений активности.

Подробная информация о продукте: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/