Построение системы СОП

Установите СОП эксперимента ПЦР, чтобы стандартизировать поведение персонала эксперимента.

Экспериментаторы строго соблюдают рабочие процедуры и минимизируют загрязнение ПЦР, которое может быть вызвано человеческим фактором, или предотвращают возникновение загрязнения в процессе работы.Кроме того, экспериментатор должен обладать соответствующими профессиональными знаниями и навыками, в том числе владеть сопутствующей аппаратурой, разъяснять весь процесс работы, владеть методами очистки от загрязнений и методами лабораторного контроля качества, уметь правильно интерпретировать результаты испытаний.

Строительная стандартная ПЦР-лаборатория

Лаборатория ПЦР принципиально разделена на четыре зоны: зону подготовки реагентов, зону обработки образцов, зону амплификации и зону анализа продуктов амплификации.Первые две области являются областями до усиления, а последние две области — областями после усиления.Зона предварительного усиления и зона постамплификации должны быть строго разделены.Экспериментальные материалы, реагенты, бумага для печати, ручки, чистящие материалы и т. д. могут поступать только из зоны предварительного усиления в зону постамплификации, то есть из зоны подготовки реагентов, зоны обработки проб, зоны амплификации и зоны анализа продукта амплификации, и не должны течь в обратном направлении.Воздушный поток в лаборатории также должен проходить из зоны предварительного усиления в зону постусиления, а не в обратном направлении.

Сокращение экспериментальных шагов

Если лаборатория выполняет только ПЦР-детекцию и идентификацию, рекомендуется использовать флуоресцентную количественную ПЦР вместо обычной ПЦР.

Результаты количественного обнаружения флуоресценции ПЦР можно собирать и анализировать по флуоресцентным сигналам, поэтому нет необходимости открывать крышку для электрофореза после реакции, что позволяет избежать загрязнения продуктов ПЦР, вызванного утечкой продуктов реакции с образованием аэрозолей.Если вы увеличите количество отверстий крышки на этапе загрузки гель-электрофореза, вероятно, произойдет аэрозольное загрязнение.Рекомендуется продвигать применение количественной ПЦР и постепенно заменять качественную ПЦР.

Принять систему защиты от загрязнения UNG

Для реакции ПЦР используется система UNG против загрязнения продуктами ПЦР.

Система использует dUTP вместо dTTP.После реакции ПЦР все продукты ПЦР (фрагменты ДНК) объединяются с dUTP;в следующем цикле реакции ПЦР фермент UNG, добавленный в систему, инкубируют при 37 ° C в течение 5 минут перед ПЦР, которая может быть специфичной для деградации всех фрагментов ДНК, содержащих dUTP, а затем проводят реакцию ПЦР.Это может полностью удалить аэрозольное загрязнение, вызванное продуктами ПЦР.Эффект показан на рисунке ниже:

Примечание. Для прямой серии ПЦР вы можете выбрать серию продуктов системы защиты от загрязнения продуктами ПЦР FJ Biotech.

Предлагать

Лабораториям, которые проводят крупномасштабное тестирование генотипа, настоятельно рекомендуется использовать систему загрязнения продуктов UNG против ПЦР для тестирования реагентов в дополнение к строительству разумных лабораторий.

Напоминание: Использование этой системы не может удалить загрязнение продукта ПЦР, которое уже было вызвано.Поэтому систему UNG следует использовать в начале соответствующего теста, а систему UNG всегда следует использовать для амплификации ПЦР, чтобы предотвратить загрязнение продуктов ПЦР.Ложно положительный.

Рекомендуется использовать систему Direct PCR-UNG от Forge Biotech при проведении крупномасштабных испытаний, таких как: Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG；

Набор для прямой ПЦР семян растений-UNG；

Набор для прямой ПЦР на ткани животных-UNG；

Набор для прямой ПЦР с хвостом мыши-UNG;

Набор для прямой ПЦР с рыбками зебры-UNG。

Эта серия наборов от Foregene позволяет не только быстро и в больших масштабах проводить ПЦР-детектирование, но и эффективно предотвращать и контролировать контаминацию продуктов ПЦР.