Введение:
РНК, научное название рибонуклеиновая кислота, ее аббревиатура происходит от RiboNucleic Acid, представляет собой тип нуклеиновой кислоты, образованный путем соединения по крайней мере десятков рибонуклеотидов через фосфодиэфирные связи.
Предпосылка исследования РНК состоит в том, чтобы выделить полную РНК, не загрязняющую окружающую среду, и основной принцип выделения РНК можно грубо резюмировать следующим образом:
1. Сначала разрушьте клетки
2. Затем удалить макромолекулярные примеси (белки, липиды, ДНК и т.д.)
3. Наконец, РНК осаждается при удалении солей и органических растворителей и дальнейшей очистке РНК.
Прошлое и настоящее метода добычи
Первым поколением метода выделения РНК является метод преципитации TRIzol (используемые реагенты включают изотиоцианат гуанидина, фенол, хлороформ и т. д.), изобретенный дедушкой по имени Петр Хомчинский и бабушкой Николеттой Сакки, потому что это изобретение позволяет извлекать РНК быстро и легко, с тех пор начался всплеск исследований РНК.
Позже дедушка продал этот патент Invitrogen, и Invitrogen продвинула этот метод в мир и стала широко используемым методом.
Позже Invitrogen была приобретена компанией Thermo!
Репрезентативный продукт: реагент TRIzol компании Invitrogen.
Однако метод преципитации TRIzol требует многократного осаждения и выделения РНК, а используемые реагенты токсичны и требуют длительного времени действия.
Таким образом, появился колоночный метод ферментативной очистки второго поколения с использованием мембраны из силикагеля в качестве материала для специфической адсорбции нуклеиновых кислот, чтобы максимизировать восстановление РНК в образце при удалении других примесей.
Метод второго поколения упрощает работу за счет стабильной работы, снижает фактор риска и повышает эффективность выделения РНК.
Репрезентативные продукты: QIAGEN RNeasy и большинство отечественных продуктов
Однако методы как первого, так и второго поколения требуют использования ДНКазы для удаления загрязнения ДНК, что создает некоторые неудобства для последующих последующих экспериментов.Остаточная ДНКаза снизит эффективность обратной транскрипции и уменьшит синтез первой цепи кДНК, что повлияет на точность результатов.
Поэтому метод экстракции третьего поколения оптимизируется на основе второго поколения.В эксперименте не нужно добавлять какие-либо ферменты, а РНК можно легко получить всего с двумя колонками.
Колонка 1: Колонка для очистки ДНК для очистки ДНК
Колонка 2: Колонка только для РНК специфически адсорбирует и извлекает РНК
Такая простая операция не только экономит время, но и облегчает проведение последующих экспериментов!
Репрезентативные продукты: QIAGEN RNeasy Plus иФорегенеПродукты серии очистки РНК
(RNeasy Plus)
(ФореджинНабор для выделения общей РНК растений)
Скажи тихо!РНК-набор Foregene также представляет собой очень простой в использовании ластик РНКазы, который может полностью удалить 400 мкг РНКазы с твердой поверхности за 1 минуту, не добавляя никаких токсичных веществ в организм человека!
рис1: Сравнительная таблица операционных процессов
Продукты Foregene могут завершить выделение РНК всего за две песни, не заставляйте других завидовать прогрессу вашего эксперимента!
рис2:Eэкспериментальные результаты сравнительная таблица
Первое поколение (1: ТРИЗОЛ)
Второе поколение (2: RNeasy QIAGEN)
Третье поколение (3: QIAGEN's RNeasy plus, 4: Foregene)
рис3: график qPCR (график кривой амплификации)
Первое поколение (зеленый цвет означает ТРИЗОЛ-, красный цвет означает ТРИЗОЛ+)
Второе поколение (небесно-голубой означает QIAGEN RNeasy-, красный означает QIAGEN RNeasy+)
Третье поколение (синий — QIAGEN RNeasy plus, зеленый — Foregene)
(Примечание: график КПЦР «-» указывает на то, что ДНКаза не добавлялась и загрязнения ДНК не удалялись. Следовательно, CT выше, и результат неточный; «+» указывает, что ДНКаза была добавлена, а загрязнения ДНК удалены, результат точный)
Каждое техническое обновление означает, что работа эксперимента развивается в более простом и удобном для пользователя направлении.
Foregene стремится помочь большему количеству ученых-исследователей сэкономить время и деньги на экспериментах, получить высококачественные экспериментальные результаты и совместно создать более ценные научные достижения.
Время публикации: 09 июля 2021 г.