Набор для выделения вирусной ДНК и РНК Наборы для подготовки к выделению вирусной ДНК и РНК для выделения
Технические характеристики
50 подготовок, 200 подготовок
Набор для выделения вирусной РНК для выделения нуклеиновой кислоты использует спин-колонку и формулу, разработанную Foregene, которая может эффективно извлекать высокочистую и высококачественную вирусную РНК из таких образцов, как плазма, сыворотка, бесклеточная жидкость организма и супернатант клеточной культуры.В набор специально добавлен линейный акриламид, который может легко захватить небольшое количество РНК из образцов.Колонка RNA-Only может эффективно связывать РНК.Набор может обрабатывать большое количество образцов одновременно.
Весь набор не содержит РНКазы, поэтому очищенная РНК не будет разлагаться.Буфер viRW1 и буфер viRW2 могут гарантировать, что полученная вирусная нуклеиновая кислота свободна от белка, нуклеазы или других примесей, что может быть использовано непосредственно для последующих молекулярно-биологических экспериментов.
Компоненты комплекта
| Линейный акриламид |
| Буфер ДХО |
| Буфер RW1, Буфер RW2 |
| ddH без РНКазы2O |
| Колонка ДНК/РНК |
| инструкции |
Особенности и преимущества
■ Работа при комнатной температуре (15-25℃) на протяжении всего процесса, без ледяной бани и низкотемпературного центрифугирования.
■ Полный комплект не содержит РНКаз, не нужно беспокоиться о деградации РНК.
■ Высокий выход нуклеиновых кислот: колонка только для ДНК/РНК и уникальная формула позволяют эффективно очищать ДНК и РНК.
■ Большая производительность по обработке проб: каждый раз можно обрабатывать до 200 мкл проб.
■ Высокая скорость: прост в эксплуатации и может быть завершен в течение 20 минут.
■ Безопасность: органический реагент не требуется.
■ Высокое качество: очищенные фрагменты РНК отличаются высокой степенью чистоты, не содержат белка и других примесей и могут использоваться в различных последующих экспериментальных целях.
Применение комплекта
Он подходит для выделения и очистки вирусной нуклеиновой кислоты в таких образцах, как плазма, сыворотка, бесклеточная жидкость организма и супернатант клеточной культуры.
Рабочий процесс
Диаграмма
Хранение и срок годности
■ Этот комплект можно хранить в течение 24 месяцев в сухих условиях при комнатной температуре (15-25 ℃);если его необходимо хранить в течение более длительного времени, его можно хранить при температуре 2–8 ℃.
■ Раствор линейного акриламида можно хранить при комнатной температуре в течение 7 дней;после получения набора выньте его и храните при температуре -20°C.
■ После добавления линейного акриламида в буфер DRL его можно хранить при температуре 2-8°C до 48 часов.Воспользуйтесь готовым решением.
Руководство по анализу проблем
Ниже приводится анализ проблем, с которыми можно столкнуться при выделении вирусной ДНК/РНК, в надежде, что он будет полезен для ваших экспериментов.Кроме того, для других экспериментальных или технических проблем, кроме инструкций по эксплуатации и анализа проблем, у нас есть специальная служба технической поддержки, которая поможет вам.Если у вас есть какие-либо потребности, пожалуйста, свяжитесь с нами: 028-83360257 или по электронной почте:
Tech@foregene.com.
Отсутствие выделения нуклеиновой кислоты или низкий выход нуклеиновой кислоты
Обычно на эффективность извлечения влияет множество факторов, таких как: содержание нуклеиновой кислоты в образце, метод работы, объем элюции и т. д.
Анализ распространенных причин:
1. Во время процедуры проводили ледяную баню или низкотемпературное (4°C) центрифугирование.
Предложение: работать при комнатной температуре (15-25°C) на протяжении всего процесса, не использовать ледяную баню и низкотемпературное центрифугирование.
2. Образец хранился неправильно или хранился слишком долго.
Рекомендация: Храните образцы при температуре -80°C и избегайте повторного замораживания и оттаивания;попробуйте использовать свежесобранные образцы для выделения нуклеиновых кислот.
3. Недостаточный лизис образца.
Рекомендация: Убедитесь, что образец и рабочий раствор для лизиса тщательно перемешаны и инкубированы при комнатной температуре (15-25°C) в течение 10 минут.
4. Неправильное добавление элюента.
Предложение: убедитесь, что ddH2O, не содержащая РНКаз, добавлена по каплям в середину мембраны очистительной колонки, и не роняйте ее на кольцо очистительной колонки.
5. В буфер RW2 был добавлен неправильный объем абсолютного этанола.
Рекомендация: Пожалуйста, следуйте инструкциям, добавьте правильный объем абсолютного этанола в буфер RW2 и хорошо перемешайте перед использованием набора.
6. Несоответствующий объем образца.
Предложение: 200 мкл образца обрабатывается на каждые 500 мкл буфера DRL.Чрезмерная обработка образцов приведет к более низкому выходу экстракции нуклеиновых кислот.
7. Несоответствующий объем элюции или неполная элюция.
Рекомендация: объем элюента очистительной колонки 30-50 мкл;если эффект элюирования неудовлетворителен, рекомендуется увеличить время при комнатной температуре после добавления предварительно нагретой ddH2O, не содержащей РНКазы, например, 5-10 мин.
8. Этанол остается на колонке после промывки буфером RW2.
Предложение: если этанол остается после центрифугирования с буфером RW2 в течение 2 минут, колонку можно поместить при комнатной температуре на 5 минут после центрифугирования для полного удаления остаточного этанола.
Очищенная нуклеиновая кислота расщепляется
Качество очищенной нуклеиновой кислоты связано с сохранением образца, загрязнением РНКазой, эксплуатацией и другими факторами.Анализ распространенных причин:
1. Собранные образцы не хранились вовремя.
Предложение: Если образец не используется вовремя после сбора, немедленно храните его при -80°C при низкой температуре.Для выделения РНК попробуйте использовать свежесобранные образцы.
2. Соберите образцы и несколько раз заморозьте и оттайте.
Предложение: Избегайте замораживания и оттаивания (не более одного раза) во время сбора и хранения образцов, иначе будет снижен выход нуклеиновых кислот.
3. РНКаза вводится в операционной или не надеваются одноразовые перчатки, маски и т.п.
Рекомендация: эксперименты по извлечению РНК лучше всего проводить в отдельной операционной комнате, а лабораторный стол должен быть очищен перед экспериментом.
Носите одноразовые перчатки и маски во время эксперимента, чтобы избежать деградации РНК, вызванной введением РНКазы в наибольшей степени.
4. Реагент был загрязнен РНКазой во время использования.
Рекомендация: заменить на новый набор для выделения вирусной ДНК/РНК для связанных экспериментов.
5. Центрифужные пробирки и наконечники пипеток, используемые для манипуляций с РНК, загрязнены РНКазой.
Предложение: убедитесь, что центрифужные пробирки, наконечники пипеток, пипетки и т. д., используемые для выделения РНК, не содержат РНКазы.
Очищенная нуклеиновая кислота влияет на дальнейшие эксперименты
ДНК и РНК, очищенные с помощью очистительной колонки, если содержание ионов соли и белка слишком велико, это повлияет на последующие эксперименты, такие как: амплификация ПЦР, обратная транскрипция и т. д.
1. Элюированные ДНК и РНК содержат остаточные ионы солей.
Предложение: Убедитесь, что в буфер RW2 добавлен правильный объем абсолютного этанола, и дважды промойте колонку для очистки при скорости центрифугирования, указанной в инструкции по эксплуатации;Выполните центрифугирование, чтобы свести к минимуму загрязнение ионами соли.
2. Элюированные ДНК и РНК содержат остатки этанола.
Рекомендация: после подтверждения промывки буфером RW2 выполните центрифугирование пустой пробирки со скоростью центрифугирования, указанной в инструкции по эксплуатации;если остатки этанола все еще есть, вы можете отцентрифугировать пустую пробирку, а затем поместить ее при комнатной температуре на 5 минут, чтобы максимально удалить остатки этанола.
Инструкции по эксплуатации:
Руководство по эксплуатации набора для выделения вирусной ДНК и РНК
