QuickEasyᵀᴹ Набор для ПЦР в реальном времени-Taqman
Описания
2× QuickEasyTMНастоящий PCR Mix-Taqman от QuickEasyTMНабор для ПЦР в реальном времени-Taqman представляет собой систему мастер-миксов нового поколения, предназначенную для реакции амплификации ПЦР в реальном времени с использованием специальных флуоресцентных зондов.Его основная ДНК-полимераза Foregene HS Taq основана на модификации антител, используется в сочетании с дополнительно оптимизированной системой ПЦР Foregene, обладает более высокой специфичностью и эффективностью амплификации.По сравнению с обычной смесью для ПЦР, она имеет более сильную способность к амплификации и более низкий уровень несоответствия.Его можно использовать в количественной флуоресцентной ПЦР для уменьшения неспецифической амплификации и повышения точности ПЦР.Это может значительно улучшить специфичность продукта и чувствительность реакции.В то же время ROX был предоставлен в качестве внутреннего эталонного красителя.
QuickEasyTMНабор Taqman для ПЦР в реальном времени имеет широкую область применения в зависимости от количества матрицы и может получить хорошую стандартную кривую в различных количественных областях, а также может точно количественно определять и обнаруживать целевые гены с хорошей воспроизводимостью и высокой достоверностью.
Технические характеристики
200 приготовлений,500 приготовлений,1000 приготовлений,2000 Подготовки
Компоненты комплекта
QuickEasyTMНабор для ПЦР в реальном времени-Taqman(20мклсистема) | ||||
Комплектация | КП-01121 | КП-01122 | КП-01123 | КП-01124 |
200 приготовлений | 500 приготовлений | 1000 приготовлений | 2000 Подготовки | |
2×БыстрыйЛегкийTM Реальный ПЦР Смешивание-Такман | 1 мл×2 | 1,7 мл×3 | 1,7 мл×6 | 1,7 мл×12 |
20×Эталонный краситель ROX | 200мкл | 0,5 мл | 1 мл | 1 мл×2 |
ddH без ДНКазы2O | 1,7 мл | 1,7 мл×2 | 10 мл | 20 мл |
ЕСЛИ ТЫ | 1кусок | 1кусок | 1кусок | 1кусок |
Особенности и преимущества
■ Уникальная система оптимизации ПЦР делает 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman более совместим.
■ Полимераза Foregene HS Taq с горячим стартом обладает более высокой эффективностью амплификации, более высокой чувствительностью амплификации и более высокой специфичностью амплификации.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix-Taqman использует уникальную систему, оптимизированную Foregene для повышения чувствительности и специфичности обнаружения специфичных для последовательностей зондов, которые можно использовать для генотипирования и определения вариаций количества копий и получения точных результатов.
■ Этот продукт поставляется с внутренним эталонным красителем ROX, который можно использовать для устранения фонового сигнала и ошибки сигнала между лунками, что удобно для клиентов при использовании в различных типах инструментов для количественной ПЦР.
Применение комплекта
■ Количественная флуоресцентная ПЦР для количественного анализа матрицы;
■ Собычная ПЦР-амплификация;
■ Может использоваться для обнаружения аллелей.
Хранение и срок годности
Набор следует хранить при -20°С в темноте;если он используется часто, его также можно хранить при 4°C в течение короткого периода времени (израсходовать в течение 10 дней).
Принципы разработки праймеров для ПЦР в реальном времени
Прямой праймер и обратный праймер
Для ПЦР в реальном времени очень важен дизайн праймера.Праймеры связаны со специфичностью и эффективностью ПЦР-амплификации и могут быть разработаны с учетом следующих принципов:
Длина праймера: 18-30 п.н.
Содержание GC: 40-60%.
Значение Tm: Программное обеспечение для проектирования праймеров, такое как Primer 5, может указать значение Tm праймера.Значения Tm восходящего и нисходящего праймеров должны быть как можно ближе.Также можно использовать формулу расчета Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).При проведении ПЦР в качестве температуры отжига обычно выбирается температура ниже значения Tm праймера, равного 5 °C (соответствующее повышение температуры отжига может повысить специфичность реакции ПЦР).
Праймеры и продукты ПЦР:
Длина продукта ПЦР-амплификации праймеров дизайна предпочтительно составляет 100-150 п.н.
По возможности следует избегать применения грунтовок для дизайна во вторичной структурной области шаблона.
Избегайте образования 2 или более комплементарных оснований между 3'-концами вышестоящего и нижестоящего праймеров.
3'-концевое основание праймера не может содержать 3 дополнительных последовательных G или C.
Сами праймеры не могут иметь комплементарных структур, иначе будет образовываться шпилечная структура, влияющая на ПЦР-амплификацию.
ATCG должен быть распределен как можно более равномерно в последовательности праймера, и следует избегать 3'-концевого основания в виде T.
Приложение 1:Дополнительный пакет компонентов Cell Direct RT-qPCR Kit
1.Раствор для лизиса клеток
| |||
Компоненты комплекта (24-луночная система лизиса/лунка) | ДРТ-01011-А1 | ДРТ-01011-А2 | |
100 т | 500 т | ||
Частья | Буфер CL | 20 мл | 100 мл |
Фореген Протеаза Плюс II | 400 мкл | 1 мл × 2 | |
Буфер СТ | 1 мл × 2 | 10 мл | |
ЧастьII | Ластик ДНК | 400 мкл | 1 мл × 2 |
2. RT Микс
| |
Компоненты комплекта (20 мкл реакционной системы) | ДРТ-01011-В1 |
200 т | |
5 × Прямая RT Микс | 800 мкл |
ddH без РНКазы2O | 1,7 мл × 2 |
| ||
Компоненты комплекта (20 мкл реакционной системы) | ДРТ-01011-C1 | ДРТ-01011-C2 |
200 т | 1000 т | |
2 × Прямая кПЦР Mix-SYBR | 1 мл × 2 | 1,7 мл × 6 |
50× Эталонный краситель ROX | 40 мкл | 200 мкл |
ddH без РНКазы2O | 1,7 мл | 10 мл |