• фейсбук
  • связанный
  • YouTube

Лабораторные исследования начинаются со сбора образцов, а сбор образцов легче всего упустить из виду.Самое главное при отборе проб — выбрать правильный тип пробы, использовать соответствующие инструменты для отбора проб, а также осуществить разумную транспортировку и обработку.

I. Тип образца

Общие типы образцов следующие:

dsafgsd

Метод отбора проб может относиться к техническим условиям для экологического мониторинга нового коронавируса на сельскохозяйственном торговом (базарном) рынке»:

1. Образцы мазков из зева, рук, одежды и других предметов практикующих врачей: необходимо использовать консервирующий раствор вируса в пробирке для забора вируса и полностью пропитать ватные тампоны для отбора проб.Поверхность грунта) наносят повторно и ополаскивают более 3 раз.При этом необходимо выполнять многоточечную распределенную выборку на поверхности опробуемого объекта.

2. Образцы мазков с поверхности пищевых продуктов. Образцы пищевых продуктов не могут быть взяты напрямую.Отбираемые пищевые продукты следует тщательно отделять и хранить в чистом пакете для проб до взятия образцов мазков.Необходимо использовать раствор для сохранения вируса в пробирке для отбора проб вируса, после полного смачивания ватного тампона для отбора проб повторно смазывать и промывать поверхность пробы пищевых продуктов, подлежащей сбору, более 3 раз.При этом необходимо выполнять многоточечный распределенный отбор проб на поверхности образца.

3. Пробы сточных вод: в соответствии с распределением дренажной системы на рынке выберите 2-3 точки отбора проб сточных вод, сосредоточив внимание на сборе внутренней сети трубопроводов, ниже по течению от направления потока воды или на соединении с муниципальной сетью трубопроводов.Чтобы взять образец тампона, погрузите его в сточные воды с помощью ватного тампона для отбора проб, чтобы он адсорбировал сточные воды, и промойте его в трубке для отбора проб более 3 раз.Для сбора проб сточных вод используйте полиэтиленовые пластиковые бутылки для сбора проб сточных вод объемом 30-500 мл;для сбора сточных вод объемом более 500 мл можно использовать полиэтиленовые пластиковые ведра или специальное оборудование для обогащения проб воды на месте.При этом необходимо проводить многоточечный распределенный отбор проб сточных вод.

4. Образцы животных: Для живых животных можно использовать мазки для взятия проб с поверхности тела, мазки из ротоглотки и анальные мазки, а также можно собирать образцы экскрементов или выделений и записывать их соответствующим образом в регистрационном листе.Для образцов животных, которые подверглись снятию шкуры и т. д., используйте ватные тампоны для сбора образцов мазков с поверхности тела и полостей тела.Необходимо использовать раствор для сохранения вируса в пробирке для отбора вирусов, чтобы полностью пропитать ватный тампон для отбора проб, а затем повторить нанесение на поверхность отбираемого пищевого образца.Шабу более чем в 3 раза.При этом необходимо выполнять многоточечный распределенный отбор проб на поверхности образца.

5. Другие приспособления: контейнеры для перевозки и разведения животных, такие как клетки или аквариумы.Во-первых, наблюдайте или разбирайтесь в конкретных типах животных, хранящихся и разводимых в контейнере, и собирайте образцы мазков с внутренней стенки контейнера или жидкие образцы содержимого.

6. Собирайте пробы аэрозолей в местах скопления людей, в плохо проветриваемых местных торговых помещениях, офисах и комнатах отдыха.

II. Инструменты выборки
1. Пробирка для сбора крови
Если вам нужно будет сделать тест на нуклеиновые кислоты и образцы антикоагулянта позже, рекомендуется использовать вакуумный кровеносный сосуд, содержащий антикоагулянт ЭДТА, для сбора крови;для образцов сыворотки рекомендуется использовать вакуумный сосуд без антикоагулянта.

fdsgfd

2. Тампон для взятия проб

Рекомендуется использовать полипропиленовые тампоны вместо тампонов из альгината кальция или тампонов с деревянными стержнями, поскольку они могут содержать вещества, инактивирующие определенные вирусы и ингибирующие ПЦР-тестирование.Тампоны с ватными головками использовать нельзя, так как хлопковые волокна обладают сильной адсорбцией белка и плохо вымываются в последующий консервирующий раствор.

В «Технических спецификациях для смешанного сбора и обнаружения нуклеиновых кислот нового коронавируса 10-в-1» четко оговорено, что «тампон для взятия проб должен быть изготовлен из полиэстера, нейлона и других не хлопковых и не альгинатных материалов, а ручка должна быть изготовлена ​​из недеревянного материала.Точка разрыва находится примерно в 3 см от верхней части головки тампона, и ее легко сломать».

CDC в Соединенных Штатах также упомянул: «Используйте только тампоны из синтетического волокна с пластиковыми или проволочными стержнями.Не используйте тампоны из альгината кальция или тампоны с деревянными стержнями,поскольку они могут содержать вещества, инактивирующие некоторые вирусы и препятствующие ПЦР-тестированию.

В настоящее время широко используется одноразовый стерильный нейлоновый тампон для флокирования в сочетании с пластиковым стержнем.Флокирующий тампон лучше поглощает воду и скорость выделения.В зависимости от разных мест отбора проб головка тампона также имеет разные размеры и волокна.Толщина.”

фсдг

3. Образец раствора для консервации при транспортировке

Раствор для сохранения инактивации вируса: соответствующее количество концентрации соли гуанидина и различные компоненты лизиса вируса могут непосредственно лизировать вирус с высвобождением нуклеиновой кислоты, инактивировать РНКазу и ДНКазу и обеспечить целостность нуклеиновой кислоты, которую можно использовать для последующего обнаружения КПЦР.Его нельзя использовать для культивирования и выделения вируса.

Раствор для транспортировки и сохранения вируса: содержит соли, аминокислоты, витамины, глюкозу и белок, необходимые для выживания вируса, которые могут поддерживать активность вируса.Его можно использовать для выделения нуклеиновых кислот и обнаружения вируса в будущем, а также для культивирования и выделения вируса.

4. Пробирка для хранения проб и пакет для проб

Пробирка для хранения образцов должна быть стерильной пластиковой пробиркой с завинчивающейся крышкой, которая не адсорбирует нуклеиновую кислоту.Каждая пробирка с пробой должна быть покрыта мешком для пробы, чтобы предотвратить утечку и загрязнение пробы.

фдсдф

III.Мешающие вещества в образце

Мешающие вещества в экспериментах ПЦР

1. эндогенная интерференция

Вещества, присутствующие в образце тела, могут мешать обнаружению других веществ.

Кровь:гем (>1 мг/мл), гемин (>0,1 нг/мкл), триглицериды, IgG и т. д.;

Моча:мочевина (20 мМ);

Табурет:растительные полисахариды, холаты;

Салфетка:протеаза, коллаген;

Молоко: протеаза, ион кальция;

Наркотики: антибиотики, противовирусные препараты, гормоны и др.

другой.

2. экзогенная интерференция

Он исходит от веществ, которые могут мешать обнаружению других веществ in vitro.Добавки к пробам и вещества, с которыми возможен контакт во время отбора и обработки проб:

Расходные материалы для испытаний: гель для отделения сыворотки, контейнер для сбора проб и резиновая пробка, катетер, жидкость для промывки катетера, порошок для перчаток и т. д.

Антикоагулянт: гепарин (>0,1 ЕД/мл), ЭДТА (>0,5 мМ) и др.;

Органические растворители: изопропанол (>0,1 МЕ/мл), бетаин, диметилсульфоксид, формамид, глицерин, ПЭГ и др.;

Дезинфицирующие средства: спирты (этанол>1%), альдегиды, фенолы (фенол>0,2%), пероксиды, сильные кислоты (HCL), сильные щелочи (NaOH) и др.;

Моющее средство:ДСН (>0,005%);

Земля: Гумус

Красители: Индиго

другой.

В реальных условиях отбора проб на открытом воздухе, например при отборе проб окружающей среды, пробы могут содержать различные мешающие вещества, и состав мешающих веществ в каждом месте разный, что требует проведения экспериментов ПЦР-помех в соответствии с местными условиями.

IV.Условия хранения и транспортировки образцов

Свежесобранные клинические образцы следует отправить в лабораторию в течение 2–4 часов после сбора при температуре от 2°C до 8°C.Хранить при 4 ℃ в течение 24 часов.Образцы, используемые для выделения вируса и обнаружения нуклеиновых кислот, следует тестировать как можно скорее.Образцы, которые можно протестировать в течение 24 часов, можно хранить при 4°C;образцы, которые не могут быть обнаружены в течение 24 часов, должны храниться при температуре -70°C или ниже (если нет- Хранить при 70°C в холодильнике при -20°C).

Краткое содержание:Стандартизированный сбор, транспортировка и хранение образцов необходимы для последующего тестирования.Ложноотрицательные результаты многих лабораторных тестов вызваны неправильным сбором, транспортировкой и хранением образцов, что приводит к деградации вирусной нуклеиновой кислоты.Однако многие лаборатории до сих пор игнорируют важность отбора проб.Я надеюсь, что эта статья сможет пробудить всеобщее внимание к выборке и сделать выборку более научной и разумной!

Похожий продукт:

Набор для обнаружения вариантов нуклеиновых кислот SARS-CoV-2 (I) (метод мультиплексной ПЦР с флуоресцентным зондом) — для обнаружения мутантов из Бразилии, Южной Африки и Великобритании


Время публикации: 17 сентября 2021 г.