Рождение ПЦР
ПЦР (полимеразная цепная реакция)
Прошло более 30 лет с момента изобретения полимеразной цепной реакции.За более чем 30 лет, после того как многочисленные ученые по всему миру продолжали дополнять и совершенствовать, технология ПЦР стала наиболее широко, часто используемым и наиболее важным методом фундаментальных исследований во всей области наук о жизни.
TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR и др., разработанные на основе широкого применения традиционной технологии ПЦР, а также недавно появившаяся Digital PCR (цифровая ПЦР), значительно обогатили исследовательские методы большинства научных исследователей и значительно ускорили процесс развития современных наук о жизни, особенно молекулярной биологии, внесли большой вклад в изучение жизни и природы человечества в целом.
Недостатки традиционной технологии ПЦР
Разделение сложных нуклеиновых кислот идобыча:
★ Традиционная технология ПЦР: требуется
★ Технология, основанная на ПЦР: требуется
★ Образцы ДНК и РНК: большие различия, сложные требования к работе
★ Опасность для тела: ядовитые реагенты наносят вред организму
Традиционная технология ПЦР и технология производных имеют обязательное условие — выделение и очистку нуклеиновых кислот.
Любой биологический образец должен пройти ряд сложных и утомительных процедур обработки образцов, чтобы получить образцы нуклеиновых кислот, отвечающие требованиям технологии ПЦР.
Разделение и выделение ДНК и РНК всегда было основной задачей, которую соответствующие научные исследователи должны повторять каждый день.
Из-за огромных различий между образцами процессы разделения и выделения ДНК и РНК также сильно различаются.Эта работа требует от операторов высокого уровня технической подготовки.Традиционные методы разделения и экстракции требуют длительного контакта с некоторыми высокотоксичными химическими реагентами.Это нанесет необратимый ущерб телу оператора и даже нанесет прямой ущерб во время эксперимента.
В то же время для тех, у кого есть большое количество образцов для исследования, разделение и выделение нуклеиновых кислот является трудоемкой задачей.
Наборы для выделения и экстракции нуклеиновых кислот, представленные на рынке, в настоящее время являются зрелыми, и существует много брендов, но они примерно одинаковы.Будь то набор для центрифугирования с мембранной колонкой с силикагелем или набор для метода магнитных шариков, он требует много времени и является дорогостоящим.Помимо стоимости комплекта, к лабораторному оборудованию также предъявляются особые требования.Автоматизированная рабочая станция, используемая в методе магнитных шариков, представляет собой очень типичное крупномасштабное дорогостоящее оборудование, которое требует огромных затрат для лаборатории.
В итоге
Перед проведением ПЦР-экспериментов предварительная обработка образцов — неизбежная и всегда головная боль исследователей.Как решить эту проблему и можно ли проводить ПЦР-эксперименты без выделения и выделения нуклеиновых кислот, всегда было мыслью большинства ученых-исследователей и персонала клинических лабораторий.
Решение Foregene
После многих лет кропотливых исследований технологии прямой ПЦР и связанных с ней наборов компания Forgene успешно преодолела множество узких мест и успешно провела прямую ПЦР для многих типов различных образцов с высокой устойчивостью и адаптируемостью, что позволило исследователям избавиться от громоздкого и опасного разделения и выделения нуклеиновых кислот.Это значительно снизит трудоемкость каждого, ускорит процесс эксперимента и сэкономит затраты на научные исследования и испытания.
Понимание и знание Forgene DirectPCR
Во-первых, технология DirectPCR представляет собой технологию прямой ПЦР для различных биологических образцов тканей.При таком техническом условии нет необходимости выделять и выделять нуклеиновые кислоты, а в качестве объекта используется непосредственно образец ткани, а для ПЦР-реакции добавляются праймеры целевого гена.
Во-вторых, технология DirectPCR представляет собой не только традиционную технологию амплификации ДНК-матрицы, но также включает ПЦР с обратной транскрипцией матрицы РНК.
В-третьих, технология DirectPCR не только напрямую выполняет рутинные качественные ПЦР-реакции на образцах тканей, но также включает реакции qPCR в реальном времени, что требует, чтобы реакционная система обладала сильной способностью противостоять фоновым флуоресцентным помехам и противодействовать эндогенным гасителям флуоресценции.
В-четвертых, образцы тканей, предназначенные для технологии DirectPCR, требуют только высвобождения матриц нуклеиновых кислот и не удаляют белки, полисахариды, ионы солей и т. д., которые мешают реакции ПЦР.Для этого требуется, чтобы полимераза нуклеиновых кислот и ПЦР-смесь в реакционной системе обладали отличной антиобратимостью и адаптивностью, а также могли обеспечить активность фермента и точность репликации в сложных условиях.
В-пятых, образцы тканей, на которые нацелена технология DirectPCR, не подвергались какой-либо обработке по обогащению нуклеиновых кислот, а количество матрицы очень мало, что требует чрезвычайно высокой чувствительности и эффективности амплификации реакционной системы.
Заключение
Технология DirectPCR является одним из наиболее важных технологических достижений и инноваций за последние 30 лет с момента рождения технологии PCR.Forgene была и остается пионером и новатором в этой технологии.
Перспективы применения технологии DirectPCR очень широки.Постоянное совершенствование и продвижение этой технологии, несомненно, внесет подрывные изменения в научные исследования и инспекционную работу.Это революция в технологии ПЦР.
Время публикации: 21 февраля 2017 г.
