Последующий анализ возможных проблем вщечныйтампон/ЗСТ card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.

Колонна очистки забита

В этом наборе при экстракции геномной ДНК колонка для очистки непосредственно адсорбируется на смеси ферментативного лизиса образца без стадии центрифугирования, и колонка для очистки может быть заблокирована из-за неполной ферментации и высокой вязкости образца.

Возможны следующие причины:

1. Неполное ферментативное переваривание образцов тканей.

Рекомендация: время обработки образца протеазой Foregene может быть соответствующим образом увеличено или супернатант может быть взят после центрифугирования при 12 000 об/мин (~13 400 об/мин).× г) в течение 5 мин.

2. Чрезмерное использование образцов тканей или больших тканей.

Рекомендация: лучше не превышать 1щечный тампон в образце;если образец слишком большой, соответственно увеличьте дозировку буфера ST1, Foregene Protease, буфера ST2.

3. Вязкость образца слишком высока.

Рекомендация: Образцы могут быть соответствующим образом разбавлены 10 мМ Tris-HCl перед экстракцией геномной ДНК.

4. Высосаны фрагменты карты крови.

Рекомендация: временное время центрифугирования на этапе 6 геномной экстракции пятна крови (FTA Card) может быть соответствующим образом увеличено.

Низкий выход или отсутствие ДНК

Часто на выход геномной ДНК влияет множество факторов, включая происхождение образца, условия хранения образца, подготовку образца, манипуляции и т. д.

Геномная ДНК не может быть получена во время экстракции

Возможные причины следующие:

1. Неправильная консервация образцов или слишком длительное хранение приводит к деградации геномной ДНК.

Рекомендация: желательно, чтобы мазки из полости рта были взяты свежими, и не рекомендуется использовать консервированные мазки для операций по извлечению геномной ДНК;Образцы капель крови должны гарантировать, что качество соответствует требованиям, а срок хранения не должен быть слишком длительным.

2. Слишком малое использование ткани может привести к тому, что соответствующая геномная ДНК не будет извлечена.

Рекомендация: следуйтебуккаl инструкции по взятию мазка из руководства по эксплуатации и протрите его как можно больше раз, чтобы к мазку из полости рта можно было прикрепить достаточное количество клеток для выделения геномной ДНК;для извлечения образца пятна крови площадь разреза пятна крови может быть соответствующим образом увеличена.

3. Протеаза Foregene хранится неправильно, что приводит к снижению ее активности или инактивации.

Рекомендация: Подтвердите условия храненияФoregene Protease или замените ее новой Foregene Protease для ферментативной реакции.

4. Неправильная консервация набора или слишком длительное время хранения, что привело к выходу из строя некоторых компонентов набора.

Рекомендация: приобрести новыйщечный мазок ДНКизоляция комплект для сопутствующих процедур.

5. Буфер WB не добавляет абсолютный этанол.

Рекомендация: Убедитесь, что буфер WB добавляет правильный объем абсолютного этанола.

6. Элюент неправильно добавлен к силиконовой пленке.

Рекомендация: добавить 65°Спредварительно нагретый элюент капают на середину силиконовой мембраны и оставляют при комнатной температуре на 5 мин для повышения эффективности элюирования.

Lнизкопродуктивная геномная ДНК изолированный

Возможны следующие причины:

1. Неправильная консервация образцов или слишком длительное хранение приводит к деградации геномной ДНК.

Рекомендация: оральные мазки желательно брать свежими, а консервированные мазки не следует использовать для выделения геномной ДНК.

2. Если количество образца ткани слишком мало, содержание выделенной геномной ДНК будет меньше.

Рекомендация: Следуйте инструкциям по взятию мазка из ротовой полости в руководстве по эксплуатации, протирая как можно больше раз, чтобы к мазку из полости рта можно было прикрепить достаточное количество клеток для выделения геномной ДНК.

3. Протеаза Foregene хранится неправильно, что приводит к снижению ее активности или инактивации.

Рекомендация: Подтвердите условия храненияthe Foregene Protease или заменить ее новой Foregene Protease для ферментативной реакции.

4. Проблемы с элюентами.

Рекомендация: для элюирования используйте Buffer EB;при использовании ddH₂O или другие элюенты, убедитесь, что pH элюата находится в пределах 7,0-8,5.

5. Неправильное добавление элюата по каплям.

Рекомендация: добавьте капли элюента в середину силиконовой мембраны и оставьте при комнатной температуре на 5 минут, чтобы повысить эффективность элюирования.

6. Элюирующая жидкость накапливается слишком мало.

Рекомендация: используйте элюент для элюции геномной ДНК, как требуется в инструкциях, по крайней мереНе меньше чем 15μl.

Lкак чистота of геномная ДНКизолированный

Низкая чистота геномной ДНК может привести к неудаче или неудовлетворительным результатам последующих экспериментов, например: ферменты не могут быть разрезаны, ПЦР не может получить интересующий фрагмент гена и т. д.

Возможные причины следующие:

1. Загрязнение гетеропротеинами, загрязнение РНК.

Анализ: колонку для очистки не промывали буфером PW;Колонка для очистки с промывкой Buffer PW не промывалась с использованием правильной скорости центрифугирования.

Рекомендация: Перед добавлением этанола убедитесь, что в супернатанте нет осадков;обязательно промойте колонку очистки согласно инструкции, и этот шаг нельзя пропускать.

2. Загрязнение ионами примесей.

Анализ: Колонка для очистки от промывки буфером WB была исключена или промыта только один раз, что привело к остаточному ионному загрязнению.

Рекомендация: Обязательно промойте Buffer WB 2 раза, как указано, чтобы максимально удалить остаточные ионы.

3. Загрязнение ферментами РНК.

Анализ: к буферу добавляли чужеродные РНКазы;Операция промывки буфера PW была неправильной, что привело к остаткам РНКазы, влияющим на последующие экспериментальные операции РНК, такие как транскрипция in vitro.

Рекомендация: Нуклеиновая кислота серии ForegeneИзоланаборы могут удалять РНК без дополнительного добавления РНКазы,таким образом Набор для выделения ДНК со буккального тампона/карты FTAнеобходимо't добавить РНКазу;Обязательно следуйте инструкциям по промывке колонки очистки Buffer PW, и этот шаг нельзя пропустить.

4. Остаток этанола.

Анализ: Буфер WB не выполнял центрифугирование пустой пробирки после промывки колонки для очистки.

Рекомендация: Выполните правильную операцию центрифугирования пустой пробирки в соответствии с инструкциями.

5. Прочие примесные загрязнения.

Анализ: Сохраненные образцы или специальные образцы не подвергаются предварительной обработке.

Рекомендация: Тщательно обработайте образец в соответствии с инструкциями.