Буккальный мазок/FTA Card Набор для выделения ДНК Набор для выделения или очистки геномной ДНК из буккальных тампонов
Описание комплекта:
Быстро очищайте высококачественную геномную ДНК из образцов буккального мазка/карты FTA.
◮Отсутствие загрязнения РНКазой:Колонка только для ДНК, входящая в комплект, позволяет удалять РНК из геномной ДНК без добавления РНКазы во время эксперимента, предотвращая заражение лаборатории экзогенной РНКазой.
◮Высокая скорость:Foregene Protease обладает более высокой активностью, чем аналогичные протеазы, и быстро переваривает образцы тканей;операция проста, и операция извлечения геномной ДНК может быть завершена в течение 20-80 минут.
◮Удобный:Центрифугирование проводят при комнатной температуре, и нет необходимости в низкотемпературном центрифугировании при 4°С или осаждении ДНК этанолом.
◮Безопасность:Экстракция органических реагентов не требуется.
◮Высокое качество:Извлеченная геномная ДНК имеет большие фрагменты, не содержит РНК, РНКазы и чрезвычайно низкое содержание ионов, что может удовлетворить требования различных экспериментов.
◮Система микроэлюирования:Это может увеличить концентрацию геномной ДНК, что удобно для дальнейшего обнаружения или эксперимента.
Описание
Этот набор представляет собой эффективный и быстрый метод получения высококонцентрированной геномной ДНК из буккальных мазков и FTA-карт (пятен крови).Использование нашей компании'Благодаря уникальной вращающейся колонке с силикагелевой мембраной, содержащей только ДНК, и формуле в сочетании с протеазой Foregene можно выделить высококонцентрированную высококачественную геномную ДНК за 80 минут.Специально разработанная небольшая колонка для очистки связывает геномную ДНК, и ДНК можно элюировать небольшим количеством (15 мкл) системы элюирования для увеличения концентрации полученной геномной ДНК, что удобно для последующего обнаружения или эксперимента.Набор может обрабатывать один или несколько образцов одновременно, а процесс очистки не требует экстракции органических веществ, таких как фенол, хлороформ, и трудоемкого осаждения изопропанолом или этанолом, а операция проста и экономит время.
Технические характеристики
50 приготовлений
Компоненты комплекта
| Буфер ST1 |
| Буфер ST2 |
| Линейный акриламид |
| Буфер PW |
| Буфер ВБ |
| Буфер ЭБ |
| Фореген Протеаза |
| Колонка только для ДНК |
| инструкции |
Особенности и преимущества
- Отсутствие загрязнения РНКазой: колонка только для ДНК, входящая в комплект, позволяет удалять РНК из геномной ДНК без добавления РНКазы во время эксперимента, что позволяет избежать загрязнения лаборатории экзогенной РНКазой.
-Высокая скорость: Foregene Protease обладает более высокой активностью, чем аналогичные протеазы, быстро переваривает образцы;простая операция.
-Удобство: центрифугирование проводится при комнатной температуре, и нет необходимости в низкотемпературном центрифугировании при 4°C или осаждении ДНК этанолом.
-Безопасность: не требуется экстракция органических реагентов.
-Высокое качество: извлеченная геномная ДНК имеет большие фрагменты, не содержит РНК, РНКазы и чрезвычайно низкое содержание ионов, что может удовлетворить требования различных экспериментов.
-Система микроэлюции: она может увеличить концентрацию геномной ДНК, что удобно для последующего обнаружения или эксперимента.
Применение комплекта
Он подходит для очистки геномной ДНК из следующих образцов: буккальные мазки, карта FTA (пятна крови).
Хранение и срок годности
- Этот комплект можно хранить в течение 12 месяцев в сухих условиях при комнатной температуре (15-25°C);если его необходимо хранить в течение более длительного периода времени, его можно хранить при температуре 2-8°C.
Примечание. При хранении при низкой температуре раствор склонен к осаждению.Перед использованием обязательно поместите раствор в набор при комнатной температуре на определенный период времени.При необходимости подогрейте его на водяной бане при 37°С в течение 10 минут для растворения осадка и перемешайте перед использованием.
-Раствор Foregene Protease имеет уникальную формулу, которая активна при хранении при комнатной температуре в течение длительного времени (3 месяца);его активность и стабильность будут лучше при хранении при 4°C, поэтому рекомендуется хранить его при 4°C, помните, что нельзя хранить при -20°C.
Колонна очистки забита
В этом наборе при экстракции геномной ДНК колонка для очистки непосредственно адсорбируется на смеси ферментативного лизиса образца без стадии центрифугирования, и колонка для очистки может быть заблокирована из-за неполной ферментации и высокой вязкости образца.
Возможны следующие причины:
1. Неполное ферментативное переваривание образцов тканей.
Рекомендация: время обработки образца протеазой Foregene может быть соответствующим образом увеличено или супернатант может быть взят после центрифугирования при 12 000 об/мин (~13 400 × g) в течение 5 минут.
2. Чрезмерное использование образцов тканей или больших тканей.
Рекомендация: лучше не использовать более 1 буккального мазка в образце;если образец слишком большой, соответственно увеличьте дозировку буфера ST1, Foregene Protease, буфера ST2.
3. Вязкость образца слишком высока.
Рекомендация: Образцы могут быть соответствующим образом разбавлены 10 мМ Tris-HCl перед экстракцией геномной ДНК.
4. Высосаны фрагменты карты крови.
Рекомендация: временное время центрифугирования на этапе 6 геномной экстракции пятна крови (FTA Card) может быть соответствующим образом увеличено.
Низкий выход или отсутствие ДНК
Часто на выход геномной ДНК влияет множество факторов, включая происхождение образца, условия хранения образца, подготовку образца, манипуляции и т. д.
Геномная ДНК не может быть получена во время экстракции
Возможные причины следующие:
1. Неправильная консервация образцов или слишком длительное хранение приводит к деградации геномной ДНК.
Рекомендация: желательно, чтобы мазки из полости рта были взяты свежими, и не рекомендуется использовать консервированные мазки для операций по извлечению геномной ДНК;Образцы капель крови должны гарантировать, что качество соответствует требованиям, а срок хранения не должен быть слишком длительным.
2. Слишком малое использование ткани может привести к тому, что соответствующая геномная ДНК не будет извлечена.
Рекомендация: следуйте инструкциям по взятию буккального мазка в руководстве по эксплуатации и протрите его как можно больше раз, чтобы к оральному мазку можно было прикрепить достаточное количество клеток для выделения геномной ДНК;для извлечения образца пятна крови площадь разреза пятна крови может быть соответствующим образом увеличена.
3. Протеаза Foregene хранится неправильно, что приводит к снижению ее активности или инактивации.
Рекомендация: Подтвердите условия хранения протеазы Foregene или замените ее новой протеазой Foregene для ферментативной реакции.
4. Неправильная консервация набора или слишком длительное время хранения, что привело к выходу из строя некоторых компонентов набора.
Рекомендация: приобретите новый набор для выделения ДНК буккального мазка для связанных процедур.
5. Буфер WB не добавляет абсолютный этанол.
Рекомендация: Убедитесь, что буфер WB добавляет правильный объем абсолютного этанола.
6. Элюент неправильно добавлен к силиконовой пленке.
Рекомендация: добавьте капли предварительно нагретого до 65 °C элюента в середину силиконовой мембраны и оставьте при комнатной температуре на 5 минут, чтобы повысить эффективность элюирования.
Выделена геномная ДНК с низким выходом
Возможны следующие причины:
1. Неправильная консервация образцов или слишком длительное хранение приводит к деградации геномной ДНК.
Рекомендация: оральные мазки желательно брать свежими, а консервированные мазки не следует использовать для выделения геномной ДНК.
2. Если количество образца ткани слишком мало, содержание выделенной геномной ДНК будет меньше.
Рекомендация: Следуйте инструкциям по взятию мазка из ротовой полости в руководстве по эксплуатации, протирая как можно больше раз, чтобы к мазку из полости рта можно было прикрепить достаточное количество клеток для выделения геномной ДНК.
3. Протеаза Foregene хранится неправильно, что приводит к снижению ее активности или инактивации.
Рекомендация: Подтвердите условия хранения протеазы Foregene или замените ее новой протеазой Foregene для ферментативной реакции.
4. Проблемы с элюентами.
Рекомендация: для элюирования используйте Buffer EB;при использовании ddH2O или другие элюенты, убедитесь, что pH элюата находится в пределах 7,0-8,5.
5. Неправильное добавление элюата по каплям.
Рекомендация: добавьте капли элюента в середину силиконовой мембраны и оставьте при комнатной температуре на 5 минут, чтобы повысить эффективность элюирования.
6. Элюирующая жидкость накапливается слишком мало.
Рекомендация: Использовать элюент для элюции геномной ДНК согласно инструкции, не менее 15 мкл.
Низкая чистота выделенной геномной ДНК
Низкая чистота геномной ДНК может привести к неудаче или неудовлетворительным результатам последующих экспериментов, например: ферменты не могут быть разрезаны, ПЦР не может получить интересующий фрагмент гена и т. д.
Возможные причины следующие:
1. Загрязнение гетеропротеинами, загрязнение РНК.
Анализ: колонку для очистки не промывали буфером PW;Колонка для очистки с промывкой Buffer PW не промывалась с использованием правильной скорости центрифугирования.
Рекомендация: Перед добавлением этанола убедитесь, что в супернатанте нет осадков;обязательно промойте колонку очистки согласно инструкции, и этот шаг нельзя пропускать.
2. Загрязнение ионами примесей.
Анализ: Колонка для очистки от промывки буфером WB была исключена или промыта только один раз, что привело к остаточному ионному загрязнению.
Рекомендация: Обязательно промойте Buffer WB 2 раза, как указано, чтобы максимально удалить остаточные ионы.
3. Загрязнение ферментами РНК.
Анализ: к буферу добавляли чужеродные РНКазы;Операция промывки буфера PW была неправильной, что привело к остаткам РНКазы, влияющим на последующие экспериментальные операции РНК, такие как транскрипция in vitro.
Рекомендация: наборы для выделения нуклеиновых кислот серии Foregene могут удалять РНК без дополнительного добавления РНКазы, таким образом, в набор для выделения ДНК со буккального мазка/карты FTA не нужно добавлять РНКазу;Обязательно следуйте инструкциям по промывке колонки очистки Buffer PW, и этот шаг нельзя пропустить.
4. Остаток этанола.
Анализ: Буфер WB не выполнял центрифугирование пустой пробирки после промывки колонки для очистки.
Рекомендация: Выполните правильную операцию центрифугирования пустой пробирки в соответствии с инструкциями.
5. Прочие примесные загрязнения.
Анализ: Сохраненные образцы или специальные образцы не подвергаются предварительной обработке.
Рекомендация: Тщательно обработайте образец в соответствии с инструкциями.
